High-Efficiency Transformation of Plasmid DNA into Yeast
Pourquoi ce travail est dans la base
Une base qui oublie comment elle a trouvé un travail ne peut pas être vérifiée. Voici les voies qui ont admis celui-ci.
Notice bibliographique
Résumé
The yeast two-hybrid system was first introduced by Fields and Song () in 1989. They showed that plasmids expressing the GAL4 BD-SNF1 and GAL4 AD-SNF4 fusion proteins activated a GALl-lacZ reporter gene. The first application of the system involved cotransformation of two plasmids into the strain GGY1:: 171—one plasmid containing the GAL4 BD fused to sequences from the 3′ end of SIR4 and the other containing GAL4 AD fused to fragments of yeast genomic DNA (). The cotransformation was accomplished by the newly reported high-efficiency lithium acetate/single-stranded carrier DNA/polyethylene glycol (LiAc/ssDNA/PEG) protocol () to generate 220,000 transformants and identified two positive clones. The efficiency of this transformation protocol was 2×104 transformants/(g of plasmid·108 cells) (), and the frequency of cotransformation was shown to range from 30 to 40% (). Screening a mam-malian cDNA library by the yeast two-hybrid system requires a large number of transformants. For example, the detection of proteins that interacted with huntingtin, the Huntington disease protein, involved a screen of 4×107 transformants from an adult human brain cDNA library (). We have reported several modifications and improvements to the LiAc/ssDNA/PEG protocol so that it can easily generate the numbers of transformants required for such screens.
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Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle