Expression of MMPs and TIMPs in Mammalian Cells
Notice bibliographique
Résumé
Expression of recombinant matrix metalloproteinases (MMPs) and tissue inhibitors of metalloproteinases (TIMPs) in mammalian cells is an important step in their functional characterization. Also, transient transfection analysis of promoter constructs driving CAT or luciferase reporter genes is a mainstay of gene regulation studies. One of the critical advantages of mammalian expression over bacterial systems for production of functional proteins is that problems of refolding, which are particularly significant for the MMPs and TIMPs, are generally not encountered. Transient expression in COS cells is very rapid and can be useful in many situations, for instance to demonstrate activity or to compare the characteristics of mutant proteins. It can also generate sufficient quantities of protein for biochemical and cell biological studies, but most often bulk production will require stable expression. In this chapter we will discuss our experiences with transient expression in COS-1 and C3H 10T1/2 mouse fibroblasts, and describe two systems that we have used for constitutive stable expression, namely BHK (Baby Hamster Kidney) and the NS0 myeloma cell line. This chapter complements the information in Chapter 11 by Butler, d’Ortho, and Atkinson who have described stable, tetracycline-regulated expression of MT1-MMP in CHOL cells. Also, the reader should note that many expression vector systems are now available commercially, and we have not attempted here to provide comparisons.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,001 | 0,001 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,003 | 0,007 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».