Purification and characterization of a small copper carrier found in mammalian blood plasma and in the urine of mice and dogs with copper overload
Notice bibliographique
Résumé
We recently discovered a small copper carrier (SCC), which in most mammals is mainly bound to larger proteins and can be released by EDTA. It normally accounts for at least 10% of total plasma copper, and more than half the total in Atp7b−/− mice and some Labrador retrievers with copper overload, where it circulates in the “free” form and appears in the urine. This suggests SCC is an alternative means of excreting copper when biliary excretion is inhibited. To begin to isolate and characterize SCC, blood plasma of human volunteers (permitted by the university IRB), pigs, cows, sheep and Labrador retriever dogs were analyzed for their quantities or free and protein‐bound SCC, using 10 and 3kDa ultrafiltration and size exclusion chromatography (SEC) with Superdex 200 and peptide FPLC. By MALDI‐TOF, the main component identified as potentially SCC consistently had a mass of 1329.5 Da (not including Cu), identical to that reported for urinary SCC from Atp7b−/− mice. It eluted between vitamin B12 and NADH in small pore SEC and not with Cu‐EDTA, which aggregated. Two amino acids were identified; a third was blocked by sulfate or phosphate. However, solution NMR indicated the samples were not pure. Preliminary data suggested phenyl HIC and anion exchange might be useful purification steps. Plasma from the pig had the highest levels of total SCC and more than 10% in the “free form”. So it was chosen to identify the best steps for large scale SCC purification.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».