Improving the Photostability of Red- and Green-Emissive Single-Molecule Fluorophores via Ni<sup>2+</sup> Mediated Excited Triplet-State Quenching
Pourquoi ce travail est dans la base
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Notice bibliographique
Résumé
Methods to improve the photostability/photon output of fluorophores without compromising their signal stability are of paramount importance in single-molecule fluorescence (SMF) imaging applications. We show herein that Ni 2+ provides a suitable photostabilizing agent for three green-emissive (Cy3, ATTO532, Alexa532) and three red-emissive (Cy5, Alexa647, ATTO647N) fluorophores, four of which are regularly utilized in SMF studies. Ni 2+ works via photophysical quenching of the triplet excited state eliminating the potential for reactive intermediates being formed. Measurements of survival time, average intensity, and mean number of photons collected for the six fluorophores show that Ni 2+ increased their photostability 10- to 45-fold, comparable to photochemically based systems, without compromising the signal intensity or stability. Comparative studies with existing photostabilizing strategies enabled us to score different photochemical and photophysical stabilizing systems, based on their intended application. The realization that Ni 2+ allowed achieving a significant increase in photon output both for green- and red-emissive fluorophores positions Ni 2+ as a widely applicable tool to mitigate photobleaching, most suitable for multicolor single-molecule fluorescence studies.
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Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,001 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle