Isomer‐specific retinoic acid biosynthesis in HeLa cells expressing recombinant class I aldehyde dehydrogenases
Notice bibliographique
Résumé
Retinal dehydrogenase type 1 (RALDH1) catalyzes the oxidation of all‐trans and 9‐cis retinal to the respective retinoic acids (RAs), whereas another member of the aldehyde dehydrogenase family, the phenobarbital‐induced aldehyde dehydrogenase (PB‐ALDH), is very poorly active. We have previously generated chimeras between these two enzymes that displayed selectivity for retinal isomers in crude bacterial extracts. Here, we have characterized the kinetic properties of the corresponding purified recombinant proteins, and demonstrate that these chimeras catalyze oxidation of retinal isomers with high efficiency and selectivity. To examine whether the selectivity of the recombinant enzymes is retained in vivo, we first assessed whether retinoid‐isomerizing activity is present in cultured eukaryotic cells. Our results demonstrate that the only RA isomers detected in RALDH1‐expressing or non‐expressing cells corresponded to the same steric conformation as the supplied retinoids, indicating a lack of measurable 9‐cis/all‐trans retinoid‐isomerizing activity. Finally, HeLa cells transfected with RALDH1 derivatives that were retinal isomer‐selective in vitro produced only the corresponding isomers of RA in vivo, establishing these enzymes as useful tools to assess the respective roles of the two RA isomers in vivo. (supported by CIHR grant)
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».