A new enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for human free and bound kallikrein 9
Pourquoi ce travail est dans la base
Une base qui oublie comment elle a trouvé un travail ne peut pas être vérifiée. Voici les voies qui ont admis celui-ci.
Notice bibliographique
Résumé
BACKGROUND: Kallikrein 9 (KLK9) is a member of the human kallikrein-related peptidases family, whose physiological role and implications in disease processes remain unclear. The active form of the enzyme is predicted to have chymotryptic activity. In the present study, we produced for the first time the active recombinant protein and monoclonal antibodies, and developed novel immunoassays for the quantification of free and bound KLK9 in biological samples. METHODS: The coding sequence of mature KLK9 isoform (mat-KLK9) was expressed in an Expi293F mammalian system and the synthesized polypeptide was purified through a two-step protocol. The purified protein was used as an immunogen for production of monoclonal antibodies in mice. Hybridomas were further expanded and antibodies were purified. Newly-produced monoclonal antibodies were screened for reaction with the KLK9 recombinant protein by a state-of-the-art immunocapture/parallel reaction monitoring mass spectrometry-based methodology. RESULTS: Anti-KLK9 antibodies were combined in pairs, resulting in the development of a highly sensitive (limit of detection: 15 pg/mL) and specific (no cross-reactivity with other KLKs) sandwich-type ELISA. Highest KLK9 protein levels were found in tonsil and sweat and lower levels in the heart, kidney and liver. Hybrid immunoassays using an anti-KLK9 antibody for antigen capture and various anti-serine protease inhibitor polyclonal antibodies, revealed the presence of an a1-antichymotrypsin-bound KLK9 isoform in biological samples. CONCLUSIONS: The ELISAs for free and bound forms of KLK9 may be highly useful for the detection of KLK9 in a broad range of biological samples, thus enabling the clarification of KLK9 function and use as a potential disease biomarker.
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Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,003 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,001 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle