Modified methods for isolation of pancreatic stellate cellsfrom human and rodent pancreas
Notice bibliographique
Résumé
Primary cultures of pancreatic stellate cells (PSCs) remain an important basis for in vitro study. However, effective methods for isolating abundant PSCs are currently lacking. We report on a novel approach to isolating PSCs from normal rat pancreases and human pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) tissue. After anaesthesia and laparotomy of the rat, a blunt cannula was inserted into the pancreatic duct through the anti-mesentery side of the duodenum, and the pancreas was slowly infused with an enzyme solution until all lobules were fully dispersed. The pancreas was then pre-incubated, finely minced and incubated to procure a cell suspension. PSCs were obtained after the cell suspension was filtered, washed and subject to gradient centrifugation with Nycodenz solution. Fresh human PDAC tissue was finely minced into 1×1×1 mm3 cubes with sharp blades. Tissue blocks were placed at the bottom of a culture plate with fresh plasma (EDTA-anti-coagulated plasma from the same patient, mixed with CaCl 2) sprinkled around the sample. After culture for 5–10 days under appropriate conditions, activated PSCs were harvested. An intraductal perfusion of an enzyme solution simplified the procedure of isolation of rat PSCs, as compared with the multiple injections technique, and a modified outgrowth method significantly shortened the outgrowth time of the activated cells. Our modification in PSC isolation methods significantly increased the isolation efficiency and shortened the culture period, thus facilitating future PSC-related research.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,010 | 0,004 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,001 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».