The Calcium Channel C-Terminal and Synaptic Vesicle Tethering: Analysis by Immuno-Nanogold Localization
Notice bibliographique
Résumé
At chemical synapses the incoming action potential triggers the influx of Ca2+ through voltage-sensitive calcium channels (CaVs, typically CaV2.1 and 2.2) and the ion binds to sensors associated with docked, transmitter filled synaptic vesicles (SVs), triggering their fusion and discharge. The CaVs and docked SVs are located within the active zones (AZ) region of the synapse which faces a corresponding neurotransmitter receptor-rich region on the postsynaptic cell. Evidence that the fusion of a SV can be gated by Ca2+ influx through a single CaV suggests that the channel and docked vesicle are linked by one or more molecular tethers (Stanley, 1993). Short and long fibrous SV-AZ linkers have been identified in presynaptic terminals by electron microscopy and we recently imaged these in cytosol-vacated synaptosome ‘ghosts’. Using CaV fusion proteins combined with blocking peptides we previously identified a SV binding site near the tip of the CaV2.2 C-terminal suggesting that this intracellular channel domain participates in SV tethering. In this study we combined the synaptosome ghost imaging method with immunogold labeling to localize CaV intracellular domains. L45, raised against the C-terminal tip, tagged tethered SVs, often as far as 100 nm from the AZ membrane whereas NmidC2, raised against a C-terminal mid-region peptide and C2Nt, raised against a peptide nearer the C-terminal origin, resulted in gold particles that were proportionally closer to the AZ. Interestingly, observation of gold-tagged SVs with NmidC2 suggests a novel SV binding site in the C-terminal mid region. Our results implicate the CaV C-terminal in SV tethering at the active zone with two possible functions: first, capturing SVs from the nearby cytoplasm and second, contributing to the localization of the SV close to the channel to permit single domain gating.
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Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,001 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
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score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».