A sensitive species-specific reverse transcription real-time PCR method for detection of Plasmodium falciparum and Plasmodium vivax
Notice bibliographique
Résumé
As the global burden of malaria decreases and countries strive towards disease elimination, there is a greater demand for sensitive diagnostics to target the submicroscopic reservoir of infection. We describe here a sensitive species-specific RT-qPCR method to differentiate between Plasmodium falciparum and P. vivax infections at the submicroscopic level. With amplification of the 18S rRNA genes from total nucleic acids (both DNA and RNA), we discern P. falciparum and P. vivax with a limit of detection of 10 parasites/mL and 18 copies/μL, respectively. This assay was validated with 519 blood samples, negative by thick-smear, from febrile and asymptomatic cohorts from Colombia. These results were directly compared to a qPCR-based method (DNA only) as the gold standard. Of the samples from patients who presented with fever ( n = 274), 34 infections were identified by RT-qPCR (16 P. falciparum , 15 P. vivax , and 3 mixed), of which only 10 infections were identified at the species level by qPCR. Within the asymptomatic cohort ( n = 245), 13 infections were identified by RT-qPCR (3 P. falciparum , 3 P. vivax , and 7 mixed), whereas the species for only one infection was determined by qPCR. We conclude that this species-specific RT-qPCR method provides a more sensitive tool for species identification compared to DNA based qPCR methods.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,002 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,002 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,001 | 0,001 |
| Communication savante | 0,001 | 0,001 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,002 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,008 | 0,004 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».