New Insights into PhaM-PhaC-Mediated Localization of Polyhydroxybutyrate Granules in Ralstonia eutropha H16
Notice bibliographique
Résumé
ABSTRACT The formation and localization of polyhydroxybutyrate (PHB) granules in Ralstonia eutropha are controlled by PhaM, which interacts both with the PHB synthase (PhaC) and with the bacterial nucleoid. Here, we studied the importance of proline and lysine residues of two C-terminal PAKKA motifs in PhaM for their importance in attaching PHB granules to DNA by in vitro and in vivo methods. Substitution of the lysine residues but not of the proline residues resulted in detachment of formed PHB granules from the nucleoid. Instead, formation of PHB granule clusters at polar regions of the rod-shaped cells and an unequal distribution of PHB granules to daughter cells were observed. The formation of PHB granules was studied by the expression of chromosomally anchored gene fusions of fluorescent proteins with PhaM and PhaC in different backgrounds. PhaM and PhaC fusions showed a distinct colocalization at formed PHB granules in the nucleoid region of the wild type. In a ΔphaC background, PhaM and the catalytically inactive PhaC C319A protein were not able to form fluorescent foci, indicating that correct positioning requires the formation of PHB. Furthermore, time-lapse experiments revealed that PhaC and PhaM proteins detach from formed PHB granules at later stages, resulting in a nonhomogeneous population of PHB granules. This could explain why growth of individual PHB granules stops under PHB-permissive conditions at a certain size. IMPORTANCE PHB granules are storage compounds for carbon and energy in many prokaryotes. Equal distribution of accumulated PHB granules during cell division is therefore important for optimal fitness of the daughter cells. In R. eutropha , PhaM is responsible for maximal activity of PHB synthase, for initiation of PHB granule formation at discrete regions in the cells, and for association of formed PHB granules with the nucleoid. Here we found that four lysine residues of C-terminal PhaM sequence motifs are essential for association of PHB granules with the nucleoid. Furthermore, we followed PHB granule formation by time-lapse microscopy and provide evidence for aging of PHB granules that is manifested by detachment of previously PHB granule-associated PhaM and PHB synthase.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
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Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,001 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
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score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».