Synthetic temperature-inducible lethal gene circuits in Escherichia coli
Notice bibliographique
Résumé
Temperature sensitivity is often used as a way to attenuate micro-organisms to convert them into live vaccines. In this work, we explore the use of temperature-sensitive (TS) genetic circuits that express lethal genes as a widely applicable approach to TS attenuation. We tested different combinations of TS repressors and cognate promoters controlling the expression of genes encoding restriction endonucleases inserted at four different non-essential sites in the Escherichia coli chromosome. We found that the presence of the restriction endonuclease genes did not affect the viability of the host strains at the permissive temperature, but that expression of the genes at elevated temperatures killed the strains to varying extents. The chromosomal insertion site of the lethal cassettes affected their functionality, and insertion at one site, ycgH, rendered them ineffective at inducing death at high temperature. Induction of a TS circuit in a growing culture led to a reduced cell mass and a reduction of the number of cells that could exclude a dye that indicated viability. Incubation of cells carrying a TS lethal gene circuit initially grown at low temperature and then suspended in phosphate buffered saline at high temperature led to about 100-fold loss of cell viability per day, compared to a minimal loss of viability for the parental strain. Strains carrying either one or two TS lethal circuits could generate mutants that survived at high temperature. These mutants included complete deletions of the lethal gene circuits.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».