Purification and biochemical characterization of a cyclodextrin glycosyltransferase from <i>Geobacillus thermoglucosidans</i> CHB1
Notice bibliographique
Résumé
A strain named Geobacillus thermoglucosidans CHB1 was isolated from stockpiled hen dung compost. The cyclodextrin glycosyltransferase (CGTase) from the fermentation broth of this microorganism was purified 350.50‐fold at a yield of 9.33% through ammonium sulfate precipitation, DEAE‐Sepharose Fast Flow chromatography, Sephadex G‐100 chromatography, and preparative electrophoresis. Sodium dodecyl sulfate–polyacrylamide gel electrophoresis (SDS–PAGE) revealed that the molecular mass of the purified enzyme was approximately 70 kDa. The CGTase maintained more than 50% cyclization activity between 50 and 80°C and optimal activity at 65–70°C and remained stable at 50°C. Its optimal pH was 5.5, and its activity showed stability between pH 5.5 and 9.5. The activity of the enzyme was significantly enhanced by LiCl, NiCl2, and MgSO4 but inhibited by AlCl3, CoCl2, FeCl3, HgCl2, BaCl2, SDS, and ZnSO4. The Km and Vmax of the reaction of this enzyme with soluble starch as the substrate were 12.5 mg/mL and 23.7 μmol/min, respectively. This enzyme produced α‐cyclodextrin (CD), β‐CD, and γ‐CD at a ratio of 0.57:1:0.21 from soluble starch as the substrate, and the conversion rate reached 60.3% from 3% soluble starch within 21 h. This CGTase also produced CDs from maltodextrin and potato starch as the substrate. To the best of our knowledge, this manuscript constitutes the first report of a CGTase purified from G. thermoglucosidans, and the results show that this enzyme might have potential for use in industrial production processes requiring stable thermal conditions, but further work is required to optimize its affinity and activation conditions.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».