Pharmacological inhibition of H3K27 trimethylation in bovine IVP embryos
Notice bibliographique
Résumé
Genes associated to organogenesis, morphogenesis and embryonic development are temporarily suppressed in pluripotent cells of mammalian embryos by the trimethylation of lysine 27 of histone H3 (H3K27 me3). H3K27 methylation is catalyzed by enzymes of the Polycomb Repressive Complex 2 (PRC2); however, this process is not entirely known. The AdoHcy hydrolase inhibitor 3-Deazaneplanocin A (DZNep) can prevent the action of the PRC2 enzymes, therefore inhibiting H3K27 me3. Nevertheless, there are no reports of the action of DZNep in embryos. The aim of this study was to evaluate the blastocyst rate and the cell number of bovine embryos cultured with 5 µM DZNep from day 3 (D3) or day 5 (D5) of embryonic development. Oocytes from Nelore females obtained from slaughterhouse ovaries were subjected to in vitro maturation (IVM) for 24 h at 38.5 °C, with 5% CO2 in air and saturated humidity. In vitro fertilization (IVF) was performed with a previously tested frozen-thawed semen from a Nelore bull. Oocytes and spermatozoa remained in coculture for 22 h under the same conditions of IVM. At D3 (considering the day of IVF as D0), the cleaved embryos were randomly separated into 3 groups: exposed to 5 mM DZNep from D3 (DZNep D3; n = 80), exposed to 5 mM DZNep from D5 (DZNep D5; n = 81) or without the addition of DZNep (control group; n = 82). Four replicates were performed, and the blastocyst rates were assessed at D8. All fertilized structures (not only the blastocysts) were fixed in 4% paraformaldehyde and the cell nuclei were stained with DAPI to estimate the number of cells. Blastocyst rates were compared between the treatments using a logistic regression test and the average number of cells by analysis of variance followed by Tukey test, with 5% of significance level. The blastocyst rate obtained with the control group was 34.1%, higher than the ones obtained with groups DZNep D3 (11.2%) and DZNep D5 (7.4%), which did not differ. The average cell number of the control group was 38.7, higher than the average cell number of groups DZNep D3 (7.5) and DZNep D5 (6.4), which did not differ. Based on these results, it can be concluded that H3K27 me3 plays an important role in embryonic gene regulation because its inhibition results in decreased blastocyst rates and the produced embryos have fewer cells.
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Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
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score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».