Improvement on the viability of preantral Bos indicus follicles cultured in vitro by addition of follicle stimulating hormone (FSH)
Notice bibliographique
Résumé
The aim of this study was to evaluate the effect of FSH addition in the medium for in vitro culture of preantral follicles of Bos indicus females. Ovaries (n=10) were collected at a local slaughterhouse from five adult cycling Bos indicus cows (Nelore) with body condition score from 2.5 to 3.5 (range 0-5). After collection, ovaries were washed in 70% ethanol and PBS (Embriolife®, Vitrocell, Brazil). The surrounding tissue was removed and ovaries were sectioned longitudinally. The ovarian cortex was divided in 3x3x1 mm fragments. One fragment per animal was immediately fixed in Bouin (non-cultured control, D0). The other fragments (n=8) were individually cultured in 24- well culture plates containing 1 ml of minimum essential medium (MEM, Gibco BRL, Rockville, MD, USA; osmolarity 300 mOsm/l, pH 7.2) supplemented (MEM+) with ITS (6.25 mg/ml insulin, 6.25 mg/ml transferrin, and 6.25 ng/ml selenium), 0.23 mM pyruvate, 2 mM glutamine, 2 mM hypoxantina, 1.25 mg/ml bovine serum albumin (BSA Gibco BRL, Rockville, MD, USA), 20 IU/ml penicillin and 200 mg/ml streptomycin. Unspecified reagents were obtained from Sigma (St. Louis, MO, USA). MEM + medium was added to different concentrations (50, 100 and 200 ng/ml) FSH (Folltropin®, Bioniche Canada Inc, Ontario, Canada). The in vitro culture medium was tested during two (D2) or six (D6) days. Every two days, the culture media was replaced by fresh aliquots. For the analysis of integrity and degree of follicular development we used histology with periodic acid-Schiff (PAS) and hematoxylin staining. The classification was based on the evaluation of follicular development stage (primordial, primary and secondary) and morphological integrity as normal or degenerated. Data were submitted to ANOVA (p ≤ 0.05). We evaluated 2,250 preantral follicles (normal or degenerated), being 772 primordial and 1,478 in development. After two days of culture, FSH at 100 ng/ml provided a higher proportion (51.2%; 128/250) of follicles morphologically intact when compared to the other groups: 27.2% (68/250) to MEM; 30.4% (76/250) to 50 ng/ml; 45.2% (113/250) to 200 ng/ml (p 0.05). We conclude that MEM+ supplemented with 100 ng/ml FSH for two or six days of in vitro culture was the most effective treatment to provide development and morphological integrity of preantral follicles from Bos indicus cows.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».