The Pumilio-domain protein PUF6 contributes to SIDER2 retroposon-mediated mRNA decay in <i>Leishmania</i>
Notice bibliographique
Résumé
Leishmania and other trypanosomatid protozoa lack control at the level of transcription initiation and regulate gene expression exclusively post-transcriptionally. We have reported previously that Leishmania harbors a unique class of s hort i nterspersed de generate r etroposons (SIDERs) that are predominantly located within 3′UTRs and play a major role in post-transcriptional control. We have shown that members of the SIDER2 subfamily initiate mRNA decay through endonucleolytic cleavage within the second conserved 79-nt signature sequence of SIDER2 retroposons. Here, we have developed an optimized MS2 coat protein tethering system to capture trans -acting factor(s) regulating SIDER2-mediated mRNA decay. Tethering of the MS2 coat protein to a reporter RNA harboring two MS2 stem–loop aptamers and the cognate SIDER2-containing 3′UTR in combination with immunoprecipitation and mass spectrometry analysis led to the identification of RNA-binding proteins with known functions in mRNA decay. Among the candidate SIDER2-interacting proteins that were individually tethered to a SIDER2 reporter RNA, the Pumilio-domain protein PUF6 was shown to enhance degradation and reduce transcript half-life. Furthermore, we showed that PUF6 binds to SIDER2 sequences that include the regulatory 79-nt signature motif, hence contributing to the mRNA decay process. Consistent with a role of PUF6 in SIDER2-mediated decay, genetic inactivation of PUF6 resulted in increased accumulation and higher stability of endogenous SIDER2-bearing transcripts. Overall, these studies provide new insights into regulated mRNA decay pathways in Leishmania controlled by SIDER2 retroposons and propose a broader role for PUF proteins in mRNA decay within the eukaryotic kingdom.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».