Quantifying exosome secretion from single cells reveals a modulatory role for GPCR signaling
Pourquoi ce travail est dans la base
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Notice bibliographique
Résumé
Exosomes are small endosome-derived extracellular vesicles implicated in cell-cell communication and are secreted by living cells when multivesicular bodies (MVBs) fuse with the plasma membrane (PM). Current techniques to study exosome physiology are based on isolation procedures after secretion, precluding direct and dynamic insight into the mechanics of exosome biogenesis and the regulation of their release. In this study, we propose real-time visualization of MVB-PM fusion to overcome these limitations. We designed tetraspanin-based pH-sensitive optical reporters that detect MVB-PM fusion using live total internal reflection fluorescence and dynamic correlative light-electron microscopy. Quantitative analysis demonstrates that MVB-PM fusion frequency is reduced by depleting the target membrane SNAREs SNAP23 and syntaxin-4 but also can be induced in single cells by stimulation of the histamine H1 receptor (H1HR). Interestingly, activation of H1R1 in HeLa cells increases Ser110 phosphorylation of SNAP23, promoting MVB-PM fusion and the release of CD63-enriched exosomes. Using this single-cell resolution approach, we highlight the modulatory dynamics of MVB exocytosis that will help to increase our understanding of exosome physiology and identify druggable targets in exosome-associated pathologies.
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Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle