Structural basis of potassium activation in plant asparaginases
Notice bibliographique
Résumé
l ‐asparaginases ( EC 3.5.1.1 ) play an important role in nitrogen mobilization in plants. Here, we investigated the biochemical and biophysical properties of potassium‐dependent (PvAspG1) and potassium‐independent (PvAspG‐T2) l ‐asparaginases from Phaseolus vulgaris . Our previous studies revealed that PvAspG1 requires potassium for catalytic activation and its crystal structure suggested that Ser‐118 in the activation loop plays a critical role in coordinating the metal cation. This amino acid residue is replaced by isoleucine in PvAspG‐T2. Reciprocal mutants of the enzymes were produced and the effect of the amino acid substitution on the kinetic parameters, allosteric effector binding, secondary structure conformation, and pH profile were studied. Introduction of the serine residue conferred potassium activation in PvAspG‐T2. Conversely, the PvAspG1‐S118I mutant could no longer be activated by potassium. PvAspG1 and the PvAspG‐T2‐I117S mutant had a similar half‐maximal effective concentration ( EC 50 ) value for potassium activation, between 0.1 and 0.3 m m . Potassium binding elicited a similar conformational change in PvAspG1 and PvAspG‐T2‐I117S, as studied by circular dichroism. However, no change in conformation was observed for PvAspG‐T2 and PvAspG1‐S118I. Analysis of kinetic parameters in function of pH indicated that potassium activation mediated by Ser‐118 influences the ionization of specific functional groups in the enzyme–substrate complex. Together, the results indicate that Ser‐118 of PvAspG1 is essential and sufficient for potassium activation in plant l ‐asparaginases. Enzyme l ‐Asparaginase ( EC 3.5.1.1 ).
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».