Covalent immobilization of cytochrome P450 BM3 (R966D/W1046S) on glutaraldehyde activated SPIONs
Notice bibliographique
Résumé
Abstract Selective hydroxylation of the C‐H bond of saturated hydrocarbon chains at room temperature is the signature of an invaluable biocatalyst, cytochrome P450 BM3 fromBacillus megaterium. Despite this remarkable ability, because of the enzyme's inherent low stability and dependence on electron supply by expensive NADPH, developing stable and economic BM3 systems is a challenging subject. To improve BM3 stability, facilitate its reuse, and reduce the process cost, this study suggests covalent immobilization of R966D/W1046S P450 BM3 on glutaraldehyde pre‐activated super paramagnetic iron oxide nanoparticles (SPIONs). This double mutant consumes less expensive cofactors like NADH and BNAH and its immobilization on magnetic support facilitates its separation and reuse. Free and immobilized enzyme performances were evaluated by 10‐pNCA hydroxylation and BM3 selectivity (hydroxylation at ω (1–3) positions of a fatty acid) was confirmed in a reaction involving myristic acid. The enzyme activity recovery was up to 60 % with 100 % enzyme binding efficiency. BM3‐SPIONs were easily separated from the reaction medium by applying a magnet, and recycled for 5 times, after which they could still present half of their initial activity. The enzyme storage stability was significantly improved: after one month of storage at 4 °C, the immobilized enzyme showed 80 % residual activity toward NADH while the soluble enzyme was inactive after a week. Binding an enzyme to fabricated SPIONs is a promising technique to increase enzyme stability and prevent downstream contamination in biocatalytic processes. In this context, BM3‐SPIONs can be a practical model system in cost‐effective large‐scale applications of such enzymes.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».