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Enregistrement W2808377110 · doi:10.1016/j.mex.2018.06.005

Single-step purification of intrinsic protein complexes in Saccharomyces cerevisiae using regenerable calmodulin resin

2018· article· en· W2808377110 sur OpenAlex
Urvi Bhojoo, Kyle K. Biggar

Pourquoi ce travail est dans la base

Une base qui oublie comment elle a trouvé un travail ne peut pas être vérifiée. Voici les voies qui ont admis celui-ci.

affAu moins un auteur déclare une institution canadienne dans l'instantané OpenAlex épinglé.
fundUn bailleur canadien est enregistré sur le travail.

Notice bibliographique

RevueMethodsX · 2018
Typearticle
Langueen
DomaineBiochemistry, Genetics and Molecular Biology
ThématiqueTransgenic Plants and Applications
Établissements canadiensCarleton University
Organismes subventionnairesNatural Sciences and Engineering Research Council of Canada
Mots-clésTandem affinity purificationSaccharomyces cerevisiaeCalmodulinAgaroseProteaseAffinity chromatographyPeptideProtein purificationProtein–protein interactionChemistryBiochemistryTobacco etch virusBiophysicsBiologyChromatographyEnzymeYeastVirus

Résumé

récupéré en direct d'OpenAlex

Characterization of protein- protein interactions is a vital aspect of molecular biology as multi-protein complexes are the functional units of cellular processes and defining their interactions provides valuable insights into their function based on a “guilt by association” concept. To identify the components in complexes, purification of the latter near homogeneity is required. The tandem affinity purification (i.e., TAP) method, coupled with mass spectrometry have been extensively used to define native protein complexes and transient protein-protein interactions under near physiological conditions (i.e., conditions approximate of the internal milieu) in Saccharomyces cerevisiae. Generally, TAP consists of two-stage protein enrichment using dual affinity tags, a calmodulin-binding peptide and a Staphylococcus aureus protein-A, separated by a tobacco etch virus protease site, which are fused to either the C- or N-terminal of the target protein. TAP-tagging has proved to be a powerful method for studying functional relationship between proteins and generating large-scale protein networks. The method described in this paper provides an inexpensive single-step purification alternative to the traditional two step affinity purification of TAP-tagged proteins using only the calmodulin-binding peptide affinity tag. Moreover, a novel protocol for the regeneration of the calmodulin-agarose resin is outlined and validated. This basic approach allows fast and cost-effective purification of proteins and their interacting partners from Saccharomyces cerevisiae.

Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.

Prédiction distillée sur la base complète

Imitation des enseignants

Ni prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.

score de la tête « metaresearch » (Codex)0,000
score de la tête « metaresearch » (Gemma)0,000
Version: codex-gemma-dda1882f352aStatut de validation: machine_predicted_unvalidated
Catégories candidatesaucune
Catégories consensuellesaucune
DomaineSignal candidat: aucune · Signal consensuel: aucune
Devis d'étudeSignal candidat: Expérimental (laboratoire) · Signal consensuel: Expérimental (laboratoire)
GenreSignal candidat: Empirique · Signal consensuel: Empirique
Score de désaccord entre enseignants0,185
Score d'incertitude au seuil0,383

Scores Codex et Gemma par catégorie

CatégorieCodexGemma
Métarecherche0,0000,000
Méta-épidémiologie (sens strict)0,0000,000
Méta-épidémiologie (sens large)0,0000,000
Bibliométrie0,0000,000
Études des sciences et des technologies0,0000,000
Communication savante0,0000,000
Science ouverte0,0000,000
Intégrité de la recherche0,0000,000
Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger)0,0000,000

Scores machine (provisoires)

Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.

Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.

Tête enseignante Opus0,060
Tête enseignante GPT0,328
Écart entre enseignants0,268 · la distance entre les deux têtes enseignantes sur ce seul travail
Statut de validationscore_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle