Molecular cloning and expression of FGF2 gene in pre‐implantation developmental stages of in vitro‐produced sheep embryos
Notice bibliographique
Résumé
Contents Early embryonic mortality is one of the main sources of reproductive loss in domestic ruminants including sheep. Fibroblast growth factor‐2 (FGF‐2) is a member of FGFs family that mediates trophoblast activities and regulates embryonic development in various species. In this study, we have cloned, characterized sheep FGF2 cDNA (KU316368) and studied the expression in sheep embryos. Ovaries of non‐pregnant sheep were collected from local abattoir and matured in culture medium at 38.5ºC, 5% CO 2 , 95% humidity for 22–24 hr. The matured oocytes were inseminated with capacitated spermatozoa in Brackett and Oliphant medium and resulted embryos were cultured in CO 2 incubator for 6–7 days to complete the developmental stages from two cells to blastocyst stage. Total RNA was extracted from immature oocytes ( n = 100), mature oocytes ( n = 100) and different stages of embryos such as 2 cell ( n = 50), 4 cell ( n = 25), 8 cell ( n = 12), 16 cell ( n = 6), morula ( n = 5) and blastocyst ( n = 3). The total RNA isolated from the oocytes and embryos was reverse transcribed and subjected to real‐time polymerase chain reaction using sequence‐specific primers and SYBR green as the DNA dye. On sequence analysis, the nucleotide sequence of sheep FGF2 exhibited highest sequence similarity with cattle (100%) and least with rat and mouse (69.2%). At the deduced amino acid level, a highest degree of similarity was noticed with cattle, buffalo, goat, pig, camel and horse (100%) and lowest degree of identity with rat, human and mouse (98.2%). The FGF2 mRNA expression was higher in immature and mature oocytes and gradually decreases from 2‐cell stage of embryo to the blastocyst stage. More over a significant differences in FGF2 mRNA expression ( p < .05) were observed between immature oocytes and all pre‐implantation stages of embryo. It can be concluded that FGF‐2 plays a significant role in pre‐implantation and early development of embryos in sheep.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,002 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».