Variability in Characterizing Escherichia coli from Cattle Feces: A Cautionary Tale
Notice bibliographique
Résumé
Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) are diverse bacteria, with seven serogroups (O26, O45, O103, O111, O121, O145, O157; “Top 7”) of interest due to their predominance in human disease. Confirmation of STEC relies on a combination of culturing, immunological and molecular assays, but no single gold standard for identification exists. In this study, we compared analysis of STEC between three independent laboratories (LAB) using different methodologies. In LAB A, colonies of Top 7 were picked after serogroup-specific immunomagnetic separation of feces from western-Canadian slaughter cattle. A fraction of each colony was tested by PCR (stx1, stx2, eae, O group), and Top 7 isolates were saved as glycerol stocks (n = 689). In LAB B, a subsample of isolates (n = 171) were evaluated for stx1 and stx2 using different primer sets. For this, approximately half of the PCR were performed using original DNA template provided by LAB A and half using DNA extracted from sub-cultured isolates. All Top 7 isolates were sub-cultured by LAB A and shipped to LAB C for traditional serotyping (TS) to determine O and H groups, with PCR-confirmation of virulence genes using a third set of primers. By TS, 76% of O groups (525/689) matched PCR-determined O groups. Lowest proportions (p < 0.05) of O group matches between PCR and TS (62.6% and 69.8%) occurred for O26 and O45 serogroups, respectively. PCR-detection of stx differed most between LAB A and LAB C. Excluding isolates where O groups by PCR and TS did not match, detection of stx1 was most consistent (p < 0.01) for O111 and O157:H7/NM. In contrast, for O45 and O103, stx1 was detected in >65% of isolates by LAB A and <5% by LAB C. Stx2 was only detected by LAB C in isolates of serogroups O121, O145, and O157:H7/NM. LAB B also detected stx2 in O26 and O157:H12/H29, while LAB A detected stx2 in all serogroups. Excluding O111 and O157:H7/NM, marked changes in stx detection were observed between initial isolation and sub-cultures of the same isolate. While multiple explanations exist for discordant O-typing between PCR and TS and for differences in stx detection across labs, these data suggest that assays for STEC classification may require re-evaluation and/or standardization.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,049 | 0,058 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,002 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,003 | 0,002 |
| Études des sciences et des technologies | 0,002 | 0,004 |
| Communication savante | 0,005 | 0,002 |
| Science ouverte | 0,003 | 0,004 |
| Intégrité de la recherche | 0,002 | 0,003 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».