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Enregistrement W2888407023 · doi:10.1371/journal.pone.0202868

Efficient genome editing using tRNA promoter-driven CRISPR/Cas9 gRNA in Aspergillus niger

2018· article· en· W2888407023 sur OpenAlex

Pourquoi ce travail est dans la base

Une base qui oublie comment elle a trouvé un travail ne peut pas être vérifiée. Voici les voies qui ont admis celui-ci.

affAu moins un auteur déclare une institution canadienne dans l'instantané OpenAlex épinglé.
fundUn bailleur canadien est enregistré sur le travail.

Notice bibliographique

RevuePLoS ONE · 2018
Typearticle
Langueen
DomaineBiochemistry, Genetics and Molecular Biology
ThématiqueCRISPR and Genetic Engineering
Établissements canadiensConcordia University
Organismes subventionnairesNatural Sciences and Engineering Research Council of Canada
Mots-clésCRISPRGenome editingGuide RNABiologyCas9PlasmidGeneticsGeneRNA polymerase IIIGenomeTransfer RNAComputational biologyRNA

Résumé

récupéré en direct d'OpenAlex

As a powerful tool for fast and precise genome editing, the CRISPR/Cas9 system has been applied in filamentous fungi to improve the efficiency of genome alteration. However, the method of delivering guide RNA (gRNA) remains a bottleneck in performing CRISPR mutagenesis in Aspergillus species. Here we report a gRNA transcription driven by endogenous tRNA promoters which include a tRNA gene plus 100 base pairs of upstream sequence. Co-transformation of a cas9-expressing plasmid with a linear DNA coding for gRNA demonstrated that 36 of the 37 tRNA promoters tested were able to generate the intended mutation in A. niger. When gRNA and cas9 were expressed in a single extra-chromosomal plasmid, the efficiency of gene mutation was as high as 97%. Co-transformation with DNA template for homologous recombination, the CRISPR/Cas9 system resulted ~42% efficiency of gene replacement in a strain with a functioning non-homologous end joining machinery (kusA+), and an efficiency of >90% gene replacement in a kusA- background. Our results demonstrate that tRNA promoter-mediated gRNA expressions are reliable and efficient in genome editing in A. niger.

Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.

Prédiction distillée sur la base complète

Imitation des enseignants

Ni prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.

score de la tête « metaresearch » (Codex)0,000
score de la tête « metaresearch » (Gemma)0,000
Version: codex-gemma-dda1882f352aStatut de validation: machine_predicted_unvalidated
Catégories candidatesaucune
Catégories consensuellesaucune
DomaineSignal candidat: aucune · Signal consensuel: aucune
Devis d'étudeSignal candidat: Expérimental (laboratoire) · Signal consensuel: Expérimental (laboratoire)
GenreSignal candidat: Empirique · Signal consensuel: Empirique
Score de désaccord entre enseignants0,040
Score d'incertitude au seuil0,672

Scores Codex et Gemma par catégorie

CatégorieCodexGemma
Métarecherche0,0000,000
Méta-épidémiologie (sens strict)0,0000,000
Méta-épidémiologie (sens large)0,0000,000
Bibliométrie0,0000,000
Études des sciences et des technologies0,0000,000
Communication savante0,0000,000
Science ouverte0,0000,000
Intégrité de la recherche0,0000,000
Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger)0,0000,000

Scores machine (provisoires)

Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.

Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.

Tête enseignante Opus0,025
Tête enseignante GPT0,276
Écart entre enseignants0,251 · la distance entre les deux têtes enseignantes sur ce seul travail
Statut de validationscore_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle