Characterization of two potential immunotherapeutics in tumor infiltrating lymphocytes (TILs) using flow cytometry and Meso Scale Discovery.
Notice bibliographique
Résumé
e15052 Background: Inter-K Peptide Therapeutics has developed two synthetic compounds that modulate kinase activity. To investigate the potential of these compounds as cancer immunotherapeutics, a flow cytometric intracellular cytokine staining (ICS) assay was developed to investigate the effect of the compounds on immune cells isolated from tumors from subjects with non-small cell lung cancer (NSCLC). In addition, the concentration of various cytokines was measured in cell culture supernatant after treatment with the compounds. Methods: After optimizing the assays in PBMC from healthy donors, the assay was used for clinical specimens. Tumor infiltrating lymphocytes (TILs) were isolated from two resected tumors by mechanical disaggregation. TILs were stimulated with or without anti-CD3/CD28 antibodies with and without Inter-K Compound A or Compound B for 72 hours. Following stimulation, cell culture supernatants were analyzed for 10 proinflammatory-related cytokines using the Meso Scale Discovery (MSD) assay. TILs were analyzed by flow cytometry with a 10-color immunophenotyping panel to measure the expression of functional markers CD25, IL-2, IFNg and Ki67 in NK, NKT, CD4 T and CD8 T cells. Results: Immunomodulation induced by Compound A treatment included an over two-fold increase in CD25 expression in CD4 T cells, statistically significant increases in IL-6 and IL-8 production while a decrease in Ki67 expression in CD8 T cells and a reduction in IL-2, IFNg, TNFa, IL-4, IL-10 and IL-13 production was observed. Compound B did not appear to have immunomodulatory properties. Conclusions: This work provides an example of the utility of flow cytometry in compound evaluation. In this case, preliminary data suggests that Compound A but not B was able to modulate the response in TIL samples in vitro, and supports the continued investigation of Compound A as an immunotherapeutic. Although TIL specimens are challenging to work with due to tumor availability and low cellular recovery, as the target for the immunotherapy, it is important that compound characterization be conducted in TIL in addition to healthy donor PBMC and cell lines.
Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.
Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,002 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».