Zinc finger nuclease‐mediated targeting of multiple transgenes to an endogenous soybean genomic locus via non‐homologous end joining
Pourquoi ce travail est dans la base
Une base qui oublie comment elle a trouvé un travail ne peut pas être vérifiée. Voici les voies qui ont admis celui-ci.
Notice bibliographique
Résumé
Summary Emerging genome editing technologies hold great promise for the improvement of agricultural crops. Several related genome editing methods currently in development utilize engineered, sequence‐specific endonucleases to generate DNA double strand breaks ( DSB s) at user‐specified genomic loci. These DSB s subsequently result in small insertions/deletions (indels), base substitutions or incorporation of exogenous donor sequences at the target site, depending on the application. Targeted mutagenesis in soybean ( Glycine max ) via non‐homologous end joining ( NHEJ )‐mediated repair of such DSB s has been previously demonstrated with multiple nucleases, as has homology‐directed repair ( HDR )‐mediated integration of a single transgene into target endogenous soybean loci using CRISPR /Cas9. Here we report targeted integration of multiple transgenes into a single soybean locus using a zinc finger nuclease ( ZFN ). First, we demonstrate targeted integration of biolistically delivered DNA via either HDR or NHEJ to the FATTY ACID DESATURASE 2‐1a ( FAD 2‐1a ) locus of embryogenic cells in tissue culture. We then describe ZFN ‐ and NHEJ ‐mediated, targeted integration of two different multigene donors to the FAD 2‐1a locus of immature embryos. The largest donor delivered was 16.2 kb, carried four transgenes, and was successfully transmitted to T 1 progeny of mature targeted plants obtained via somatic embryogenesis. The insertions in most plants with a targeted, 7.1 kb, NHEJ ‐integrated donor were perfect or near‐perfect, demonstrating that NHEJ is a viable alternative to HDR for gene targeting in soybean. Taken together, these results show that ZFN s can be used to generate fertile transgenic soybean plants with NHEJ ‐mediated targeted insertions of multigene donors at an endogenous genomic locus.
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Prédiction distillée sur la base complète
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Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
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