Analysis of Mitochondrial Dimensions and Cristae Structure in Pluripotent Stem Cells Using Transmission Electron Microscopy
Notice bibliographique
Résumé
Dynamic alterations to mitochondrial structure and function regulate cell fate decisions and underlie multiple age-related and genetic diseases that are modeled using embryonic stem cells (ESCs) and induced pluripotent stem cells (iPSCs). Transmission electron microscopy (TEM) can be used to obtain high-resolution micrographs of mitochondria, but mitochondrial ultrastructure is easily distorted during specimen processing. This unit describes a method that preserves mitochondrial membrane structure from adherent ESC cultures for TEM sample preparation. This procedure is useful for assessing ultrastructural changes to mitochondria during differentiation, reprogramming, or experimental manipulation of ESC metabolism. We provide comprehensive protocols for: (1) preparation of ESC cultures for TEM; (2) retrieval of thin sections from individual ESCs; and (3) contrast staining and morphometric analysis of mitochondria and cristae. This unit also describes an alternative procedure for samples with low cell numbers and a supporting protocol for morphometric image analysis. Collectively, these protocols allow for the observation and quantitative analysis of mitochondria in ESCs. © 2018 by John Wiley & Sons, Inc.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».