Monitoring individual cell-signaling activity using combined metal-clad waveguide and surface-enhanced fluorescence imaging
Notice bibliographique
Résumé
Evanescent field based biosensing systems such as surface plasmon resonance (SPR), diffraction gratings, or metal-clad waveguides (MCWGs) are powerful tools for label-free real-time monitoring of signaling activity of living cells exposed to hormones, pharmacological agents, and toxins. In particular, MCWG-based imaging is well suited for studying relatively thick objects such as cells due to its greater depth of penetration into the sensing medium, compared to SPR. Label-free methods, however, provide only indirect measurements in that the measured signal arises from local changes in material properties rather than from specific biomolecular targets. In the case of cells, the situation is especially complex as the measured label-free signal may result from a combination of very diverse sources: morphological changes, intra-cellular reorganization, cascaded molecular events, protein expression etc. Consequently, deconvolving the contributions of specific sources to a particular cell response profile can be challenging. In the following, we present a cell imaging platform that combines two distinct sensing modalities, namely label-free MCWG imaging and label-based surface enhanced fluorescence (SEF), designed to facilitate the identification of the underlying molecular and structural contributions to the label-free MCWG images. We demonstrate the bimodal capabilities of this imaging platform in experiments designed to visualize actin cytoskeleton organization in vascular smooth muscle cells. We then monitored the real-time response of HEK293 cells expressing the Angiotensin 1 receptor (AT1R), when stimulated by the receptor agonist Angiotensin II (AngII). The analysis of the simultaneous label-free signal obtained by MCWG and the intracellular calcium signal resulting form AT1R activation, measured by SEF, allows relating label-free signal features to specific markers of receptor activation. Our results show that the intracellular calcium levels normally observed following AT1R activation are not required for the initial burst of cellular activity observed in the MCWG signal but rather indicates signaling activity involving the intracellular kinase ROCK.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».