72 Effect of incubation temperature and of CO2 concentration during early cleavage on equine in vitro embryo production
Notice bibliographique
Résumé
Intracytoplasmic sperm injection (ICSI) is currently being used for equine in vitro embryo production for both research and clinical purposes. However, some basic parameters for in vitro embryo production, such as the optimum incubator temperature and the optimum CO2 concentration/pH of medium for early embryo development, have not yet been established in the horse. The incubation temperature used by many laboratories for equine in vitro embryo production is 38.2°C, whereas the range of normal rectal temperature in the horse is 37.2 to 38.3°C. In Exp. 1, we evaluated maturation, cleavage, and blastocyst rates under 3 different culture temperatures. Cumulus-oocyte complexes were recovered from slaughterhouse-derived ovaries and shipped overnight at room temperature. Oocyte maturation was performed concurrently in separate incubators set to 37.2, 37.7, or 38.2°C. Mature oocytes were subjected to ICSI, then cultured in mixed gas (6% CO2, 5% O2, and remainder N2) at the same temperature at which they were matured. Embryo culture media used were a commercial human medium (global) for Days 0 to 5, then DMEM/F-12 from Day 5 to 10, both with 10% fetal bovine serum (FBS). In Exp. 2, we evaluated 3 different CO2 concentrations (6, 6.5, or 7% CO2) in mixed gas for the Day 0 to 5 culture in global + FBS, at 38.2°C. Cumulus-oocyte complexes were recovered from live mares by transvaginal aspiration and held overnight at room temperature; all other parameters remained the same as for Exp. 1. Data were analysed by Fisher’s exact test. In Exp. 1, a total of 280 oocytes were utilised; the outcomes for the 37.2, 37.7, and 38.2°C treatments were, respectively: maturation rates of 33, 38, and 42%; cleavage rates of 84, 86, and 88%; and blastocyst rates per injected oocyte of 35, 44, and 44%. There were no significant differences among the 3 temperature treatments for any parameter (P > 0.2). In Exp. 2, the pH of the global + FBS medium was 7.38, 7.35, and 7.3 for 6, 6.5, and 7% CO2, respectively. A total of 106 mature oocytes underwent ICSI; the outcomes for the 3 CO2 atmospheres, respectively, were cleavage rates of 68, 80, and 70% and blastocyst rates per injected oocyte of 42, 54, and 27%. The blastocyst rate for the 7% CO2 treatment was significantly lower than that for the 6.5% CO2 treatment (P < 0.05). These results indicate that equine in vitro embryo production is equally effective throughout the range of normal equine body temperature, and that equine blastocyst production is sensitive to small changes in CO2 atmosphere/pH of medium during early cleavage-stage development. Research was supported by the Clinical Equine ICSI Program, Texas A&M University, the Link Equine Research Endowment, Texas A&M University, and Fonds en Santé Équine (FSÉ), Faculté de Médecine Vétérinaire, and Université de Montréal.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».