Application of a TLR overexpression cell model in pyrogen detection
Notice bibliographique
Résumé
Pyrogens are components derived from microorganisms that induce complex inflammatory responses. Current approaches to detect pyrogens are complex and difficult to replicate, thus there is a need for new methods to detect pyrogens. We successfully constructed a pyrogen-sensitive cell model by overexpressing Toll-like receptor (TLR)2, TLR4, MD2, and CD14 in HEK293 cells. Since the cytokine IL-6 is specifically released upon stimulation of the TLR2 and TLR4 signaling pathways in response to pyrogen stimulation, we used it as a read out for our assay. Our results show that IL-6 is released in response to trace amounts of pyrogens in our cell model. Pyrogen incubation times and concentrations were explored to determine the sensitivity of our cell model, and was found to be sensitive to 0.05 EU/ml of LPS and 0.05 ug/ml of LTA after stimulation for 5 hr. Our TLR overexpressing cell model, with IL-6 as readout, could be a new method for in vitro testing of pyrogens and applicable for evaluating the safety of drugs.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».