Dimerization of a ubiquitin variant leads to high affinity interactions with a ubiquitin interacting motif
Notice bibliographique
Résumé
We previously described structural and functional characterization of the first ubiquitin variant (UbV), UbV.v27.1, engineered by phage display to bind with high affinity to a specific ubiquitin interacting motif (UIM). We identified two substitutions relative to ubiquitin (Gly10Val/His68Tyr) that were critical for enhancing binding affinity but could only rationalize the mechanism of action of the Tyr68 substitution. Here, we extend our characterization and uncover the mechanism by which the Val10 substitution enhances binding affinity. We show that Val10 in UbV.v27.1 drives UbV dimerization through an intermolecular β-strand exchange. Dimerization serves to increase the contact surface between the UIM and UbV and also affords direct contacts between two UIMs through an overall 2:2 binding stoichiometry. Our identification of the role of Val10 in UbV dimerization suggests a general means for the development of dimeric UbVs with improved affinity and specificity relative to their monomeric UbV counterparts. Statement: Previously, we used phage display to engineer a UbV that bound tightly and specifically to a UIM. Here, we discovered that tight binding is partly due to the dimerization of the UbV, which increases the contact surface between the UbV and UIM. We show that UbV dimerization is dependent on the Gly10Val substitution, and posit that dimerization may provide a general means for engineering UbVs with improved binding properties.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».