Piglets Are Vulnerable to Intestinal Inflammation and Infection Because of Expression of Low‐Affinity Jejunal Alkaline Phosphatase Activities
Notice bibliographique
Résumé
Intestinal alkaline phosphatase (IAP) plays a pivotal role in protecting gut health through catalyzing the hydrolytic dephosphorylation of the lipid A moiety of endotoxin lipopolysaccharides (LPS) and other emblematic members of pathogen‐associated‐molecular patterns (PAMPs) such as ATP, ultimately detoxifying endotoxins and preventing gut dysbiosis and disorders. Characterization of IAP hydrolytic activities, including enzyme affinity ( K m ) and the maximum enzyme activity ( V max ), has been reported in pigs and other mammalian species by using the chromogenic synthetic substrate P ‐nitrophenyl phosphate (pNPP) rather than using relevant physiological substrates such as ATP and LPS under the physiological pH conditions. This study was conducted to determine kinetics of young porcine jejunal alkaline phosphatase in hydrolyzing the dephosphorylation of ATP, the lipid A moiety of LPS and pNPP at pH 7.4 and 37 °C. Jejunal samples were collected from four 10‐day old Yorkshire pigs and were pulverized to be homogenous under liquid N 2 . The LPS kinetic experiments were conducted with 11 gradient concentrations of LPS, isolated from E. coli 0111:B4, ranging 0 – 5 mg/mL in incubation media. The ATP kinetic experiments were conducted with 11 gradient concentrations of ATP, ranging 0 – 5 mM in incubation media. Free phosphorus (Pi) release was measured by using the PiColorLock detection reagent (Innova Biosciences). Contributions of the non‐specific background Pi associated with ATP and LPS in the time course and the kinetic experiments were corrected. The pNPP kinetic experiments were conducted with 16 gradient concentrations of pNPP, ranging 0 – 6 mM in incubation media. All enzymatic incubations were conducted with 19 – 27 μg of the homogenized porcine jejunal protein. The kinetics (parameter estimates ± SE, P < 0.05) of young porcine jejunal alkaline phosphatase activities were obtained, including V max values of 2.5 ± 0.4 ug/mg protein·min (n = 11), 1.1 ± 0.2 ug/mg protein·min (n = 11), and 0.12 ± 0. 01 umol/mg protein·min (n = 16); and K m values of 1.255 ± 0.498 mM (n = 11), 2.388 ± 0.794 mg/mL (n = 11), and 0.145 ± 0.036 mM (n = 16), for the hydrolysis of ATP, LPS and pNPP, respectively. Our results reveal the young porcine IAP K m value 41 times higher in comparison with reported K m value of human IAP in dephosphorylating ATP, 3 times higher when compared with reported human IAP dephosphorylating LPS, and 5 times higher when compared with reported human IAP hydrolyzing pNPP. Results of this study show that young porcine jejunal IAP activity affinity is several fold lower in detoxifying endotoxin LPS the other emblematic PAMPs member ATP in comparison with humans, suggesting that young pigs are susceptible to gut inflammation and infection. Support or Funding Information NSERC Discovery Program of Canada and Metagen Enzyme Corporation
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,003 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,001 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».