Quantification of the Lamin A/C Transcript Variants in Cancer Cell Lines by Targeted Absolute Quantitative Proteomics and Correlation with mRNA Expression
Notice bibliographique
Résumé
Lamin A/C proteins have key roles in nuclear structural integrity and chromosomal stability. Lamin A/C cumulative protein expression of all variants is reported by semi-quantitative Western blotting. To date, there have not been specific antibodies for the individual Lamin A/C transcript variants. We developed a mass spectrometric approach for the quantification of Lamin A/C transcript variants. A signature peptide for each specific splice variant of Lamin A/C was selected. A LC–MS/MS assay based on the selected signature peptides and their labeled internal standards was established to measure the expression of Lamin A/C transcript variant concentrations. The method validation was carried out according to Food and Drug Administration (FDA) guidelines. The expression levels of the Lamin A/C transcript variants were measured in samples derived from MCF7 and U937 cell lines. RT-qPCR assay was also used to quantitate and compare the mRNA expression of splice variants of Lamin A/C. The established and validated method showed a great linearity, sensitivity, and precision. The different expressed Lamin A/C variants in different cell lines were measured and their levels were in concordance with qRT-PCR results. The developed method is reproducible, reliable, and sensitive for measuring different Lamin A/C transcript variants in different cell lines.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,002 | 0,002 |
| Études des sciences et des technologies | 0,001 | 0,001 |
| Communication savante | 0,001 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».