NHE8 attenuates Ca<sup>2+</sup>influx into NRK cells and the proximal tubule epithelium
Notice bibliographique
Résumé
To garner insights into the renal regulation of Ca 2+ homeostasis, we performed an mRNA microarray on kidneys from mice treated with the Ca 2+ -sensing receptor (CaSR) agonist cinacalcet. This revealed decreased gene expression of Na + /H + exchanger isoform 8 (NHE8) in response to CaSR activation. These results were confirmed by quantitative real-time PCR. Moreover, administration of vitamin D also decreased NHE8 mRNA expression. In contrast, renal NHE8 protein expression from the same samples was increased. To examine the role of NHE8 in transmembrane Ca 2+ fluxes, we used the normal rat kidney (NRK) cell line. Cell surface biotinylation and confocal immunofluorescence microscopy demonstrated NHE8 apical expression. Functional experiments found 5-( N-ethyl- N-isopropyl)amiloride (EIPA)-inhibitable NHE activity in NRK cells at concentrations minimally attenuating NHE1 activity in AP-1 cells. To determine how NHE8 might regulate Ca 2+ balance, we measured changes in intracellular Ca 2+ uptake by live cell Ca 2+ imaging with the fluorophore Fura-2 AM. Inhibition of NHE8 with EIPA or by removing extracellular Na + -enhanced Ca 2+ influx into NRK cells. Ca 2+ influx was mediated by a voltage-dependent Ca 2+ channel rather than directly via NHE8. NRK cells express Cav1.3 and display verapamil-sensitive Ca 2+ influx and NHE8 inhibition-augmented Ca 2+ influx via a voltage-dependent Ca 2+ channel. Finally, proximal tubules perused ex vivo demonstrated increased Ca 2+ influx in the presence of luminal EIPA at a concentration that would inhibit NHE8. The results of the present study are consistent with NHE8 regulating Ca 2+ uptake into the proximal tubule epithelium.
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Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,001 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
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