A Fluorescence‐Based Assay for Quantitative Analysis of Phospholipid:Diacylglycerol Acyltransferase Activity
Notice bibliographique
Résumé
Phospholipid:diacylglycerol acyltransferase (PDAT) catalyzes the acyl-CoA-independent triacylglycerol (TAG) biosynthesis in plants and oleaginous microorganisms and thus is a key target in lipid research. The conventional in vitro PDAT activity assay involves the use of radiolabeled substrates, which, however, are expensive and demand strict regulation. In this study, a reliable fluorescence-based method using nitrobenzoxadiazole-labeled diacylglycerol (NBD-DAG) as an alternative substrate was established and subsequently used to characterize the enzyme activity and kinetics of a recombinant Arabidopsis thaliana PDAT1 (AtPDAT1). We also demonstrate that the highly toxic benzene used in typical PDAT assays can be substituted with diethyl ether without affecting the formation rate of NBD-TAG. Overall, this method works well with a broad range of PDAT protein content and shows linear correlation with the conventional method with radiolabeled substrates, and thus may be applicable to PDAT from various plant and microorganism species.
Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.
Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».