Proteomic-based evaluation of nuclear transport of NLS-tagged trastuzumab-emtansine with enhanced cytotoxic potency
Notice bibliographique
Résumé
ABSTRACT Nuclear transport receptors (NTRs) are the only proteins able to transport large molecular weight payloads into the nucleus. A dominant area of molecular therapeutic research is the extension of the use of NTRs to target the nucleus for the development of pharmaceuticals or as tools for investigating fundamental biological questions. Although several examples of synthesized peptides harbouring nuclear localization signal (NLS) sequences conjugated to various payloads exist in the literature, the assumption has been that transport occurs by classical nuclear localization via the NTRs importin-α and importin-β. This assumption is relevant to nuclear-targeted therapeutics that aim for full potential clinical impact. In addition, fundamental research can benefit from unbiased approaches to investigate the role of NTRs. Herein, we report the construction of a novel NLS-modified agent composed of trastuzumab-emtansine (T-DM1) coupled to cell accumulator (Accum), a technology that enables monoclonal antibodies to escape endosome entrapment and accumulate conjugated payloads in the nucleus without abrogating affinity or specificity to target antigens. Accum harbours a classical NLS sequence from SV-40 large T-antigen. We demonstrate that routing T-DM1 to the nucleus successfully increased cytotoxic potency in the HER2-positive cell line SKBR3. More importantly, through the development of a novel bait-prey proteomic approach, we show that the non-classical NTR importin 7 and not importin-α/importin-β was required for the cytotoxicity effect. This result was validated by siRNA knock down. Our findings also indicate that by discovering an unanticipated NTR regulator of an NLS-modified agent, this study demonstrates the utility of combining an unbiased proteomic approach to probe NTR function in mammalian cell system and, is a foresight for future NLS-based development initiatives.
Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.
Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».