Overcoming the deceptively low viability of CD45<sup>+</sup> cells in thawed cord blood unit segments
Notice bibliographique
Résumé
Background and objectives There is no standard methodology for post‐thaw sample preparation for viability analysis of umbilical cord blood units (CBU). A common challenge faced by CB bank is for their product to meet the post‐thaw cell viability threshold for CD45 + cells set at 40% by NetCord‐FACT. The objective of this work was to improve the post‐thaw staining method to maximize CD45 + cell viability so that clinically valuable samples meet the NetCord‐FACT threshold criteria for CD45 + and CD34 + cell viabilities. Materials and methods Samples of CBU buffy coats and CBU segments were thawed and taken for staining. Various parameters were evaluated on CD45 + and CD34 + cell viability as measured by 7‐actinomycin D (7‐AAD) staining. Results The results revealed that initiating the staining at 20 min post‐thaw instead of 30, shortening the red cell lysis treatment, or performing lysis on ice and removing this step all together, all improved the viability of CD45 + cells. Using CBU segments, it was shown that the most effective approach in increasing the viability of CD45 + cells was the complete omission of red cell lysis step. However, removal of the lysis step can create technical artefacts during flow cytometry acquisition that results in an underestimation of the viability of CD34 + cells. This can be avoided and CD34 + cell viability restored with additional thresholding on CD45 signal. Conclusion CB CD45 + cells are sensitive to red cell lysis treatment post‐thaw; omission of this step provides the best viability and ultimately better reflects the quality of cells used for transplantation.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».