Determination of biocatalytic parameters of a copper radical oxidase using real-time reaction progress monitoring
Notice bibliographique
Résumé
An Auxiliary Activity Family 5 (AA5) copper-radical alcohol oxidase (AlcOx) with promiscuous activity towards simple alkyl and aromatic alcohols was evaluated using real-time reaction progress monitoring. Reaction kinetics using variable time normalization analysis (VTNA) were determined from reaction progress curves. By this approach, a detailed view of the entire reaction time course under various conditions was obtained and used to identify parameters that will inform further process optimization development. Optimal activity was found impacted by several factors, including reaction pH, oxygen saturation, and the source of a co-oxidant, either HRP or a chemical alternative, potassium ferricyanide. Analysis of reaction progress curves demonstrated that reaction stalling occurred as a result of oxygen depletion and from a loss of enzyme activity over time. The cooperativity between AlcOx, horseradish peroxidase (HRP), and catalase that result in enhanced reactivity was explored, with reaction pH being identified as a key factor for optimal activity. The results show that a process with HRP is more robust than with potassium ferricyanide, but that both oxidants likely activate AlcOx by a similar mechanism. The phenomenon of product inhibition was investigated for representative reactants, revealing that reaction inhibition was more significant for butyraldehyde than for benzaldehyde. Our analysis suggests that this is linked to the greater proportion in which butyraldehyde exists in the hydrated form.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».