In‐Vivo Knockdown of Cortactin Disrupts Basal Tubulobulbar Complexes and Results in the Presence of Redundant Junction Related Ectoplasmic Specializations
Notice bibliographique
Résumé
In the mammalian testis, spermatogenic cells begin development in the germ cell niche or basal compartment of the seminiferous epithelium. They then translocate through massive junction complexes between neighboring Sertoli cells to enter the adluminal compartment and further differentiate. Removal of the junctions above and formation of new junctions below is necessary for the translocation of cells from one compartment to the other. Tubulobulbar complexes’ (TBCs) are Sertoli cell specific structures that are proposed to internalize intercellular junctions in the seminiferous epithelium. TBCs are actin cuffed endocytic structures that share many features in common with clathrin mediated endocytosis (CME). Both TBCs and CME vesicles begin with the association of a clathrin coated pit on the plasma membrane and the development of dendritic actin ‘cuffs’ on their neck regions. Rather than vesiculating, the necks of TBCs continue to lengthen into microns long structures, eventually developing an actin free ‘bulb’ region, which develops an ORP9 positive membrane contact site with an associated leaflet of endoplasmic reticulum. One of the proteins known to be highly specific for the dendritic actin around TBCs is the actin related protein, cortactin. It previously has been shown that knockdown of cortactin causes shortening and disorganization of those TBCs at the apex of the epithelium that are associated with late spermatids, and this is correlated with a delay in sperm release. However, it has not been shown if disruption of cortactin expression has similar effects on TBCs associated with the basal junction complexes and whether or not this has an effect on junction removal. Here we use electron microscopy (EM) and stimulated emission depletion (STED) super resolution microscopy to evaluate the phenotype of rat testes injected 5 times over a 9‐day period with siRNA targeting cortactin, and use western blots to confirm the knockdown. In vivo knockdown of cortactin in rat testes disrupts basal TBCs when sections labeled for ORP9 and cortactin/actin are evaluated by STED, and leads to the presence of redundant junction related material (ectoplasmic specializations) when evaluated by EM. These data are consistent with the conclusion that TBCs internalize basal junctions and are likely part of the mechanism of spermatocyte translocation from basal to adluminal compartments of the epithelium. Support or Funding Information Supported by a Natural Sciences and Engineering Research Council of Canada (NSERC) Discovery Grant to A Wayne Vogl (RGPIN‐2018‐03727).
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,001 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,003 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».