Establishment of a cell‐based quantitative reverse transcription‐polymerase chain reaction (RT‐qPCR) assay for detection of multivalent rotavirus vaccine
Notice bibliographique
Résumé
Abstract Because of deficiencies of traditional potency tests in rotavirus detection, a one‐step TaqMan probe‐based quantitative reverse transcription‐polymerase chain reaction (RT‐qPCR) assay combined with cell‐based method was established to determine the infectious potency of the target virus in multivalent live rotavirus vaccines in vitro. Series dilutions of rotavirus samples were inoculated into Vero cells and cultured for 24 hours. The cells were lysed and the potency was detected by RT‐qPCR. The reference standards with a known titer (lgCCID 50 /mL) were assayed in parallel, and the potencies of each sample were determined using parallel line method. The specificity, precision and accuracy of the assay were evaluated, respectively. The results showed that messenger RNA produced during rotavirus replication was the primary template of RT‐qPCR and the primers and probes were specific to each strain. The coefficient of variation of different wells and different working days did not exceed 6% and the results of the assay were proved to be concordant with those of cell culture infective dose 50% with a relative deviation less than 5%. This assay is a more rapid, cost‐effective and high‐throughput way for detecting multivalent rotavirus vaccine, and will be a valuable tool in the quality control and stability monitoring of live multivalent rotavirus vaccine.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,002 | 0,005 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».