Rates of homology directed repair of CRISPR-Cas9 induced double strand breaks are lower in naïve compared to primed human pluripotent stem cells
Notice bibliographique
Résumé
Gene editing in human pluripotent stem cells (hPSC) is a powerful tool for understanding biology, for drug discovery and gene therapy. Naïve hPSC have been suggested to be superior for gene editing compared to conventional ‘primed’ hPSC. Using droplet digital PCR, we uncover the kinetics of Cas9-induced double strand break repair in conventional hPSC. Cut but unrepaired alleles reach their maximum after 12–24 h. Homology directed repair plateaus after 24 h, whereas repair by non-homologous end joining continues until 48 h after Cas9 introduction. Using this method, we demonstrate that the rate of homology directed repair to resolve Cas9-induced double strand breaks is 40% lower in naïve hPSC compared to conventional hPSC, correlating with, and feasibly explained by, a higher number of cells in G1 phase of the cell cycle in naïve hPSC. Therefore, naïve hPSC are less efficient for CRISPR/Cas9-mediated homology directed repair.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».