An Effective Method for Quantifying RNA Expression of IbsC‐SibC, a Type I Toxin‐Antitoxin System in <i>Escherichia coli</i>
Notice bibliographique
Résumé
Toxin and antitoxin (TA) systems are small genetic modules consisting of a toxin protein and an RNA or protein antitoxin. It is difficult to study their functions in a large part due to the lack of effective methods to study toxin RNAs, which usually exist at exceptionally low levels. Herein, we describe a sensitive reverse transcription quantitative PCR (RT-qPCR) method that is able to quantitate such RNA species. The method was directed at detection of the toxin mRNA of the ibsC-sibC TA pair, and its high specificity was validated by sequencing. The approach was used to determine relative expression of the IbsC and SibC RNAs at different cell-growth phases; this revealed an expression pattern that cannot be explained by the prevailing notion of growth stasis by the toxin and rescue by the antitoxin. The usefulness of the method was further showcased by the determination of average cellular copy numbers of the IbsC-SibC RNAs in wild-type E. coli cells and RNA abundance in E. coli cells engineered with extra copies of the ibsC-sibC genes. With a robust method to quantitate cellular small RNAs at very low concentrations, we are now equipped to study the expression of TA systems under different conditions to gain useful insights about their functions.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».