Identification of a novel N-linked glycan on the archaellins and S-layer protein of the thermophilic methanogen, Methanothermococcus thermolithotrophicus
Notice bibliographique
Résumé
Motility in archaea is facilitated by a unique structure termed the archaellum. N -Glycosylation of the major structural proteins (archaellins) is important for their subsequent incorporation into the archaellum filament. The identity of some of these N -glycans has been determined, but archaea exhibit extensive variation in their glycans, meaning that further investigations can shed light not only on the specific details of archaellin structure and function, but also on archaeal glycobiology in general. Here we describe the structural characterization of the N -linked glycan modifications on the archaellins and S-layer protein of Methanothermococcus thermolithotrophicus , a methanogen that grows optimally at 65 °C. SDS-PAGE and MS analysis revealed that the sheared archaella are composed principally of two of the four predicted archaellins, FlaB1 and FlaB3, which are modified with a branched, heptameric glycan at all N -linked sequons except for the site closest to the N termini of both proteins. NMR analysis of the purified glycan determined the structure to be α-d- glycero -d- manno -Hep3OMe6OMe-(1–3)-[α-GalNAcA3OMe-(1–2)-]-β-Man-(1–4)-[β-GalA3OMe4OAc6CMe-(1–4)-α-GalA-(1–2)-]-α-GalAN-(1–3)-β-GalNAc-Asn. A detailed investigation by hydrophilic interaction liquid ion chromatography–MS discovered the presence of several, less abundant glycan variants, related to but distinct from the main heptameric glycan. In addition, we confirmed that the S-layer protein is modified with the same heptameric glycan, suggesting a common N -glycosylation pathway. The M. thermolithotrophicus archaellin N -linked glycan is larger and more complex than those previously identified on the archaellins of related mesophilic methanogens, Methanococcus voltae and Methanococcus maripaludis . This could indicate that the nature of the glycan modification may have a role to play in maintaining stability at elevated temperatures.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
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Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
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score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».