Evaluation of duplicated reference genes for quantitative real-time PCR analysis in genome unknown hexaploid oat (Avena sativa L.)
Notice bibliographique
Résumé
Abstract Background Oat ( Avena sativa L.), a hexaploid crop with unknown genome, has valuable nutritional, medicinal and pharmaceutical uses. However, no suitable RGs (reference genes) for qPCR (quantitative real-time PCR) has been documented for oat yet. Single-copy gene is often selected as RG, which is challengeable or impactable in unexplored polyploids. Results In this study, eleven candidate RGs, including four duplicated genes, were selected from oat transcriptome. The stability and the optimal combination of these candidate RGs were assessed in 18 oat samples by using four statistical algorithms including the ΔCt method, geNorm, NormFinder and BestKeeper. The most stable RGs for “all samples”, “shoots and roots of seedlings”, “developing seeds” and “developing endosperms” were EIF4A ( Eukaryotic initiation factor 4A-3 ), UBC21 ( Ubiquitin-Conjugating Enzyme 21 ), EP ( Expressed protein ) and EIF4A respectively. Among these RGs, UBC21 was a four-copy duplicated gene. The reliability was validated by the expression patterns of four various genes normalized to the most and the least stable RGs in different sample sets. Conclusions Results provide a proof of concept that the duplicated RG is feasible for qPCR in polyploids. To our knowledge, this study is the first systematic research on the optimal RGs for accurate qPCR normalization of gene expression in different organs and tissues of oat.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,004 | 0,004 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,002 | 0,002 |
| Bibliométrie | 0,002 | 0,002 |
| Études des sciences et des technologies | 0,001 | 0,001 |
| Communication savante | 0,001 | 0,001 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,002 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».