A novel paperclip double-stranded RNA structure demonstrates clathrin-independent uptake in the mosquito Aedes aegypti
Notice bibliographique
Résumé
RNA interference (RNAi) has become a widely used technique of knocking down a gene's expression in insects, but its efficacy in some species is limited by a reduced ability of the cells to take in and disperse the double-stranded RNA (dsRNA) throughout the cytoplasm. While RNA transport proteins such as SID-1 and its orthologues can facilitate dsRNA uptake in some invertebrate species, dsRNA uptake in many insects examined to date appears to be facilitated by clathrin-mediated endocytosis (CME). In this study, we used pharmacological inhibitors and RNAi-mediated knockdown of endocytic genes to provide evidence that CME is the primary means of dsRNA uptake in the mosquito Aedes aegypti. Inhibition of clathrin-mediated endocytosis was sufficient to supress uptake of short (21 nt) interfering RNAs (siRNAs), short (23 nt) hairpin RNAs (shRNAs), and long (>200 nt) dsRNA molecules in Aedes aegypti cultured cells and larvae. In contrast, we observed that short (23 nt) "paperclip" RNAs (pcRNAs), with partially closed ends, efficiently enter cells via a clathrin-independent pathway and effectively facilitate transcript knockdown. This alternative dsRNA structure may prove useful in insects generally considered recalcitrant to RNAi and in insect populations where resistance to RNAi-insecticides may arise through changes in dsRNA uptake mechanisms.
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Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
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score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
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