Oligomerization of Equilibrative Nucleoside Transporter 1
Notice bibliographique
Résumé
Equilibrative nucleoside transporter 1 (ENT1) is a ubiquitously expressed membrane transporter in mammalian cells responsible for the transmembrane flux of endogenous nucleosides such as adenosine, as well as, chemotherapeutic, anti‐vial, and anti‐parasitic nucleoside analogues . The present study was designed to assess whether ENT1, like many other solute transporters, functions as a dimer or higher order oligomer. Previous functional studies from our laboratory suggested the presence of two populations of ENT1 with differential sensitivities to sulfhydryl reagents at the plasma membrane. Studies of ENT1 photoaffinity labelled membranes revealed multiple molecular mass bands on denaturing gels. Non‐denaturing Blue Native PAGE resulted in a molecular mass of ENT1 of 137 kDa (versus 55kDa monomer) suggesting a higher order oligomer or association with other proteins. Co‐immunoprecipitation studies on HEK293 cells expressing MYC‐ and HA‐hENT1 indicated that hENT1 can oligomerize. This was confirmed by immunofluorescence experiments, which showed a 1.5‐fold increase in colocalization of MYC‐hENT1 and HA‐hENT1 signal when the amount of transfected HA‐hENT1 cDNA was gradually increased while MYC‐hENT1 was kept constant in HEK293 cells. Finally, proximity ligation assays, performed on WT‐hENT1‐PK15 cells transiently transfected with MYC‐hENT1, showed interaction between the two pools of hENT1. These data support the hypothesis that ENT1 exists in the plasma membrane as a dimer, and possibly higher level protein complexes. Further work regarding the identity of the ENT1 complex components as well as the impact of these interactions on the function and inhibitor/substrate association with ENT1 remains to be determined. Supported by the Natural Science and Engineering Research Council of Canada.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,002 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».