Visualization of the Skeletal Muscle Stem Cell Niche in Fiber Bundles
Notice bibliographique
Résumé
Skeletal muscle stem cells (MuSCs) reside in a complex niche composed of the muscle fiber plasma membrane and the laminin-rich basal lamina surrounded by the microvasculature, as well as different supportive cell types such as fibro-adipogenic progenitors residing in the interstitial extracellular matrix. Within the first few hours after tissue damage, MuSCs undergo cytoskeletal rearrangements and transcriptional changes that prime the cells for activation. Due to their time-consuming nature, enzymatic methods for liberation of single muscle fibers with fully quiescent MuSCs are challenging. Moreover, during enzymatic digestion, important niche components including the microvasculature and the collagenous interstitial matrix are destroyed. Here, we provide a method for the visualization of MuSCs on muscle fibers in their intact niche. Our method relies on mechanical teasing of fiber bundles from fixed skeletal muscles. We demonstrate that teased muscle fiber bundles allow the investigator to capture a representative snapshot of the MuSC niche in skeletal muscle, and outline how stem cell morphology and different microenvironmental components can be visualized. © 2021 The Authors. Current Protocols published by Wiley Periodicals LLC. Basic Protocol 1: Isolation of fiber bundles Basic Protocol 2: Immunofluorescence staining of MuSCs on fiber bundles Support Protocol: Preparation of Sylgard dishes.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,005 | 0,002 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».