Long‐Lived Organotypic Slice Culture Model of the Rat Basolateral Amygdala
Notice bibliographique
Résumé
Organotypic slice cultures (OTCs) have been employed in the laboratory since the early 1980s and have proved to be useful for the study of a number of neural systems. Our recent work focuses on the development of behavioral stress resilience induced by repeated daily injections of neuropeptide Y into the basolateral amygdala (BLA). Resilience develops over weeks, persisting to 8 weeks. To unravel the cellular mechanisms underlying neuropeptide Y-induced stress resilience we developed in vitro OTCs of the BLA. Here, we provide an optimized protocol that consistently yields viable and healthy OTCs containing the BLA and surrounding tissue using the interface method, prepared with slices taken from postnatal (P) day 14 rats. We explain key points to optimizing tissue viability and discuss mitigation or avoidance of pitfalls that can arise to aid in successful implementation of this technique. We show that principal neurons in BLA OTCs (8 weeks in vitro = equivalent postnatal day 70) develop into networks that are electrophysiologically very similar to those from acute slices obtained from older rats (P70) and respond to pharmacological treatments in a comparable way. Furthermore, we highlight how these cultures be used to further understand the molecular, cellular, and circuit-level neuropathophysiological changes underlying stress disorders. BLA OTCs provide long-term physiological and pharmacological results whose predictions were borne out in vivo, supporting the validity of the BLA OTC as a model to unravel BLA neurocircuitry. Recent preliminary results also support the successful application of this approach to preparing long-lived OTCs of BLA and neocortex from mice. © 2021 Wiley Periodicals LLC. Basic Protocol 1: Organotypic slice culture Support Protocol 1: Changing medium Support Protocol 2: Drug incubations Basic Protocol 2: Excision of OTC slices from inserts Support Protocol 3: Fixation of slices.
Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.
Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,001 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,002 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,003 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».