Snake Venom Botrocetin Induces GPIb-Independent Platelet Aggregation
Notice bibliographique
Résumé
Abstract Abstract Introduction：Snake venom-derived botrocetin facilitates von Willebrand factor (VWF) binding to GPIbα, and has been used clinically for the detection of von Willebrand disease (VWD) and GPIb-related disorders. Botrocetin has also been widely used experimentally for the development and characterization of potential antithrombotic drugs targeting the GPIb-VWF axis. Although compelling evidence suggests GPIb is responsible for botrocetin-induced VWF binding and platelet aggregation, some reports suggest that botrocetin could induce platelet aggregation in some Bernard-Soulier syndrome (BSS) patients who lack a functional GPIb complex. However, the alternative mechanism for botrocetin-induced BSS platelet aggregation and the receptor(s) mediating this action are unclear. Methods: Botrocetin was purified from the lyophilized venom of Bothrops jararaca using ion-exchange column chromatography. Light transmission aggregometry assay was performed using platelet-rich plasma (PRP) from human, wild type (WT) mice, GPIbα-deficient mice, αIIbβ3-deficient mice and VWF-deficient mice, or CHO cells stably transfected with αIIbβ3 integrin. O-sialoglycoprotein endopeptidase (OSGE) was used to cleave the N-terminal extracellular domain of GPIbα. The binding of botrocetin, VWF and fibrinogen to platelets from WT or the gene-deficient mice were measured by flow cytometry. Antibodies against GPIbα (SZ2, NIT A) and integrin αIIbβ3 (abciximab, JON/A, M1, PSI E1) were used to investigate the binding site of botrocetin. Perfusion chamber assay was used to measure thrombus formation under different shear stresses. Results: We discovered that botrocetin induced aggregation of human platelets lacking the N-terminal extracellular domain of GPIbα and platelets from GPIbα-deficient mice in the presence of VWF. This VWF-dependent, GPIbα-independent platelet aggregation induced by botrocetin was inhibited by αIIbβ3 antagonists. Botrocetin also induced aggregation of CHO cells stably transfected with αIIbβ3 in VWF-dependent manner. Further experiments with gel-filtered platelets showed that botrocetin competitively bound to the ligand-binding area exposed on αIIbβ3 and blocked fibrinogen and other ligands from binding to the active state of αIIbβ3 in the absence of VWF. Botrocetin inhibited platelet aggregation and thrombus formation in VWF-deficient mice. Conclusion: Integrin αIIbβ3 is the alternative receptor that mediates VWF-dependent, GPIb-independent platelet aggregation induced by botrocetin. However, via targeting αIIbβ3, botrocetin itself inhibits platelet aggregation in the absence of VWF. These results demonstrate versatility in the mechanism of botrocetin, which may provide snakes containing this toxin the adaptability necessary to aggregate platelets/thrombocytes of different prey or predators. Our data reveals a previously unknown role of botrocetin in the integrin-VWF interaction and also provides insight into developing new antithrombotic drugs that target the active conformation of integrin αIIbβ3. The target switching of botrocetin between GPIb-VWF and αIIbβ3-VWF may explain the possible misdiagnosis of the GPIb-related congenital disorders evaluated by botrocetin. Disclosures No relevant conflicts of interest to declare.
Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.
Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».