Direct Fusion of the CAII Carbonic Anhydrase to the AE1 Cl‐/HCO3‐ Exchanger
Pourquoi ce travail est dans la base
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Notice bibliographique
Résumé
Some bicarbonate transporters bind to carbonic anhydrases (CA) to enhance their transport activities. Carbonic anhydrases catalyze the reversible conversion of CO 2 to HCO 3 − + H + and thus produce or consume the substrate of HCO 3 − transport. To further understand the physiological role of the CA/bicarbonate transporter interaction, we investigated the transport activity of the human Cl − /HCO 3 − exchanger isoform, AE1, by fusing CAII to its C‐terminal region (AE1.CAII). As a control, AE1 was also fused to the catalytically inactive CAII mutant, V143Y, to generate AE1.CAIIV143Y. AE1 alone and the two fused proteins were expressed by transient transfection of HEK293 cells. Anion exchange activity, monitored from the rates of intracellular pH (pH i ) change upon shifting extracellular Cl − from 140 mM to 0 mM and back, was determined by measuring the fluorescence of the pH indicator dye, 2′,7′‐bis (2‐carboxylethyl)‐5(6)‐carboxyfluorescein (BCECF). The anion transport activity of AE1.CAII, normalized for AE1 expression level, was 119% ± 15% of cells transfected with AE1 alone. Interestingly, the transport activity of AE1.CAIIV143Y was markedly reduced (47% ± 10%) compared to AE1 alone. The reduction of activity of the AE1.CAIIV143Y fusion relative to AE1 alone suggests that the fusion compromises AE1 folding or activity. We conclude that catalytically active CAII tethered to the cytosolic surface of AE1 activates Cl − /HCO 3 − exchange activity.
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Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
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score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle