Notice bibliographique
Résumé
Introduction:We have described the significance of sperm surface P68 in sperm-zona pellucida (ZP) binding.P68 peptide sequencing and molecular cloning identify P68 as arylsulphatase A (AS-A), generally recognized as a lysosomal enzyme.Our objective was to demonstrate the presence of AS-A on the sperm head surface and its participation in gamete interaction. Materials and methods: IgG fraction was purified from rabbit anti-AS-A antiserum, generated against human liver AS-A, by protein A chromatography.Immunoelectronmicroscopy was performed in live mouse and pig sperm, treated with anti-AS-A IgG.The function of sperm surface AS-A was assessed by in-vitro gamete binding assays using anti-AS-A IgG-treated sperm.In addition, the in-vivo fertilization rate in mice inseminated with anti-AS-A IgG-treated sperm was determined.Sperm treated with preimmune rabbit IgG served as controls in all experiments.Direct binding of AS-A, conjugated with Alexa 430 fluorochrome, to intact and solubilized ZP was also determined and K d of the binding was analysed by Scatchard plotting.A competitive binding assay was performed to determine the specificity of pig ZP sulphoglycoprotein to which AS-A bound.All experiments were performed more than three times and results from treated samples were analysed for significant differences from the control values using Student's t-test.Results: Immunoelectronmicroscopy revealed gold labelling of AS-A over the sperm head surface.Pretreatment of sperm with anti-AS-A antibody resulted in dose-dependent inhibition of sperm-ZP binding, with the maximum inhibition (~75%) at 100 µg/ml anti-AS-A IgG.Furthermore, a marked inhibition (~60% average from five experiments) of IVF in female mice inseminated with 200 µg/ml anti-AS-A IgG was observed.We also demonstrated that Alexa-430 AS-A bound directly to both intact and solubilized pig and mouse ZP, with K d of 0.50 and 0.21 µmol/l respectively.These values were in same range as that observed for mouse sperm-ZP binding, supporting the concept that AS-A participated in sperm-ZP interaction.Furthermore, competitive binding assays revealed that pig ZP3α sulphoglycoprotein, a major player in sperm binding, inhibited AS-A-ZP binding to 15% of the control value at only 2 µmol/l.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,001 | 0,000 |
| Communication savante | 0,002 | 0,001 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,004 | 0,002 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,674 | 0,448 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; l’étiquette directe de Gemma et le classifieur distillé Codex s’accordent sur ce qui est montré ici.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».