2 5’ Untranslated Region-Based Detection of Genetically Diverse APPV Strains in US Midwest
Notice bibliographique
Résumé
Abstract Atypical porcine pestivirus (APPV), an RNA virus member of the Flaviviridae family, has been associated with congenital tremor in newborn piglets. Previous qPCR-based assays, targeting the polyprotein coding sequences of APPV, were unable to detect the virus in novel cases of congenital tremor originated from multiple swine farms from the U.S. Midwest (MW). The polyprotein coding genes of APPV were characterized by a low level of sequence conservation ranging from 58.2 to 70.7% among 15 global APPV strains. In contrast, the 5’ untranslated region (UTR) was found to have a much greater degree of sequence conservation of 81.0% seen among the 15 global and new 4 MW strains, and as high as 91.5% when comparing only 5 MW strains. The complete 5’ UTR sequence of the APPV strains originated from MW was obtained by utilizing the template switching approach followed by amplification and dideoxy sequencing. Notably, previously identified potentially crucial regions for the correct function of the APPV internal ribosome entry site (IRES) were found to overlap with the most highly conserved 5’UTR segments, suggesting their functional role in viral protein translation. By targeting 100% conserved 5’UTR regions across 19 global and MW strains, a new qPCR assay was designed which was able to detect APPV in well documented cases of congenital tremor which originated from 5 MW farm sites (1-18 samples/site). The assay was found to have a detection sensitivity of 6.5 APPV copies (Cq ~38.4). Due to the potential functional importance of the highly conserved 5’UTR sequences targeted by our newly developed qPCR assay, we expect that assays targeting this region would broadly detect APPV strains that are diverse in space and time.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».